Продолжительность процесса зависит от того, насколько гладко и беспрепятственно проходят его отдельные этапы:
1.
ВЗЯТИЕ ПРОБЫ КРОВИ
10-миллилитровая проба периферической материнской крови берется медицинской сестрой. Это требование минимизирует потенциально загрязнение пробы мужской ДНК, так как это может повлиять на правильность определения пола плода в том случае, если пациентка желает его знать. Пробу крови можно делать на 10-й неделе беременности* и анализ не должен проводиться на пустой желудок.
Скрининговый тест TRISOMY test может быть проведен между 11 и 22 неделями беременности. Самые ранние или самые последние возможные варианты основывается на желании беременной женщины и мнении наблюдающего ее врача, который должен принимать во внимание общее состояние здоровья пациентки.
Находящаяся в 10-миллилитровой пробирке, содержащей ЭДТА, проба крови должна быть промаркирована стикером со
штрихкодом (он прилагается к специальной форме заказа TRISOMY test), с указанием имени пациентки и личного идентификационного номера. После наполнения пробирки пробу необходимо осторожно перемешать, 10 раз перевернув ее кверху дном, но не встряхивая. Биологический материал хранится при комнатной температуре 4 ° С. Замерзание пробы недопустимо.
Если ожидается, что период транспортировки будет осуществляться в течение длительного времени, т.е. более, чем на 36 часов после взятия крови, необходимо использовать систему Streck Cell Free DNA BCT.
* В соответствии с постановлением Комитета по вопросам этики Министерства здравоохранения Словацкой Республики, Лаборатория предоставляет результаты теста только после завершения 12-й недели беременности.
Лаборатория не представит никаких результатов теста, если пациентка не завершила 12-ю неделю беременности!
2.
ДОСТАВКА ПРОБЫ В ЛАБОРАТОРИЮ
Вместе с правильно заполненной специальной формой заказа каждая проба помещается в отдельный транспортировочный пакет и термопакет (при 4 °C). Пробу направляют в Центральную лабораторию Medirex a. s. в Братиславе в течение 36 часов с момента анализа крови.
3.
ОПЛАТА ТЕСТА
Оплата тестов TRISOMY test, TRISOMY test XY, TRISOMY test + зависит от спецификации страны.
4.
УСЛОВИЕ НАЧАЛА РАБОТЫ С ПРОБОЙ
Сразу после идентификации платежа проба будет проанализирована специальным методом.
5.
В ЛАБОРАТОРИИ: АНАЛИЗ ДАННЫХ И ОЦЕНКА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СПЕЦИАЛЬНОГО ПРОГРАММНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ.
ᅠᅠ
1. Обработка пробы крови
Сразу после доставки тестовой пробирки в лабораторию плазма отделяется. Она содержит генетический материал плода во внеклеточной форме. Полученную таким образом плазму затем доставляют в лаборатории ООО «Trisomy test, s.r.o.» где она будет обработана.
2. Изоляция ДНК
Свободно циркулирующая ДНК получается из плазмы путем многоступенчатой точной очистки. В пробе содержится как материнская, так и ДНК плода. ДНК плода составляет около 13% ДНК, полученной из плазмы. Если процедура отбора крови не соответствует стандарту, кровяные клетки, содержащиеся в пробе, могли могут разрушаться, из-за чего доля плодной ДНК снижается, а определение потенциальной трисомии плода становится невозможным. После изоляции выполняется проверка качества пробы с целью выявления потенциального разрушения кровяных клеток. При подтверждении низкого качества пробы мы связываемся с лечащим врачом и просим его предоставить новую пробу крови.
3. Подготовка пробы ДНК для анализа
Изолированная ДНК проходит процесс специальной лабораторной обработки, известный как подготовка библиотеки последовательности ДНК (секвенирование). Для анализа проб с использованием методов секвенирования нового поколения необходимо использовать библиотеки последовательности ДНК. Поскольку общее количество ДНК, выделяемое из плазмы, очень мало, мы используем
полимеразную цепную реакцию для ее амплификации. Подготовка библиотеки ДНК, достаточной для анализа, занимает 48 часов.
4. Проверка качества пробы
TRISOMY test - трудоемкий и дорогостоящий скрининговый тест, результат которого в значительной степени зависит от правильной подготовки пробы для анализа. Используя чувствительный флуоресцентный электрофоретический анализ, мы можем проверить, подходит ли подготовленная библиотека последовательности ДНК для дальнейшего анализа. Правильно подготовленные библиотеки последовательности ДНК используются на следующем этапе, который называется «анализ секвенирования».
5. Окончательный анализ – секвенирование
Читая 30 миллионов фрагментов в ходе 20-часовой аналитической процедуры, мы выполняем полногеномный
анализ с низким покрытием (считываем каждый десятый нуклеотид, а не все подряд). Этот метод секвенирования дает приблизительно 500 МБ данных, которые затем оцениваются посредством специального программного обеспечения, использующего уникальный математический алгоритм. Наш высокопроизводительный сервер способен оценивать данные, полученные из одного образца в течение нескольких минут.
6. Результаты теста
На основании данных, полученных с использованием прогрессивного алгоритма и сложной статистической и математической модели, специалисты нашей лаборатории определяют результат анализа.
6.
ДОСТАВКА РЕЗУЛЬТАТОВ ТЕСТА
Результаты секвенирования отправляются из лаборатории ООО «Trisomy test, s.r.o.» обратно в Medirex. Отчет о результатах теста доставляют прямо врачу, назначившему обследование и взявшему пробу крови пациентки.
Пациентку информирует о результате TRISOMY test, TRISOMY test XY или TRISOMY test + ее лечащий врач. Информация о поле плода может быть предоставлена только после того, как пациентка завершила первый триместр беременности.
| РЕЗУЛЬТАТ | ИНТЕРПРЕТАЦИЯ | РЕКОМЕНДАЦИЯ |
|---|---|---|
| Отрицательный результат | Трисомия хромосомы 21, 18 или 13 не выявлена. | Отрицательный результат скринингового теста не подлежит проверке другим методом скринингового теста. Лечащий врач, обычно гинеколог, определяет дальнейшие мероприятия. |
| Положительный результат | Выявлена трисомия в одной из исследованных хромосом. | Любой положительный результат скринингового теста TRISOMY test, TRISOMY test XY или TRISOMY test + подлежит генетическим обследованиям с инвазивным взятием генетического материала. Крайне важно, чтобы пациентка консультировалась с ее результатами в клинике, специализирующейся на медицинскую генетику. |
| Неинформативный результат | Предоставленная проба не может быть обработана в соответствии со стандартной лабораторной практикой, либо результат скринингового теста не отвечает на диагностический запрос даже после повторного анализа пробы. | Повторная проба крови будет взята бесплатно, как правило, 14 дней спустя. Концентрация ДНК плода в материнской крови постепенно увеличивается во время беременности. |
Метод скринингового теста
Отрицательные результаты применяются только в отношении типов трисомии, которые тест определяет (хромосомы 21, 18 и 13). Нельзя исключать возможность того, что плод имеет другие генетические или негенетические расстройства, не выявляемые данным тестом. Результат теста может быть искажен из-за многоплодной беременности, синдрома «исчезающего плода при двоне» или посторонней ДНК в пробе материнской крови в результате, например, переливания крови, трансплантации стволовых клеток, трансплантации органов, а также злокачественными заболеваниями беременной женщины или ее плода. Кроме того, частота выявления хромосомных аномалий в отдельных случаях зависит от таких факторов, как плацентарный мозаицизм, синдром «исчезающего плода при двоне», точечная мутация, инактивация генов и других типов генетических или эпигенетических механизмов. В таких случаях анализу крови должна предшествовать консультация с лабораторией.
Несмотря на высокую чувствительность и специфичность тестов, положительный результат скринингового теста TRISOMY test, TRISOMY test XY или TRISOMY test + должен быть подтвержден генетическим обследованием амниотической жидкости или пробой ворсинчатого хориона. Положительный результат TRISOMY не является достаточной причиной для прерывания беременности.*
Из-за биологических и технологических ограничений точность исследования по синдрому микроделеции TRISOMY test + относительно ниже по сравнению с тестом трисомии 21, 18, и 13. Учитывая низкую частоту встречаемости микроделеций в популяции, не проводилось никаких исследований, которые достоверно подтвердили бы точность нашего теста, которым определяются эти синдромы.
* Перед тем как рекомендовать TRISOMY test, примите во внимание не только цель, преимущества и потенциальный риск такого типа обследования, но и существующие альтернативы TRISOMY test. Кроме того, изучите всю имеющуюся информацию о здоровье беременной пациентки, которая может повлиять на ваш выбор наиболее подходящей медицинской процедуры.
* В соответствии с рекомендацией Комитета по вопросам этики Министерства здравоохранения Словацкой Республики, опубликованной 4 февраля 2013 года (http://www.health.gov.sk/Clanok?eticka-komisia-uznesenie-40-46).
Вы хотите предоставлять тест Trisomy test?
Вы лаборатория и хотите стать нашим партнером?